（1）0.1 mol/l pH6.8 PBS：Na2HPO4·12H2O 1.09 g，NaH2PO4·H2O 6.05 g，蒸餾水溶解后定容至500 ml，4℃保存?zhèn)溆谩?/div>
（2）TMB貯備液：TMB 60 mg 溶于10 ml 二甲基亞砜（DMSO）中4℃保存?zhèn)溆谩?/div>
（3）TMB應用液：臨用取0.1 mol/l pH6.0 PBS 10 ml，TMB貯備液100 ul，30%H2O2 15 ul 混勻即可。
二、實驗步驟
1. 抗體包被
（1）抗體用包被液稀釋至20 ug/ml，加入聚苯乙烯反應板中每孔100 ul，加蓋后放4℃過夜。
（2）傾去孔內液體，加入洗滌液后靜置3 min，傾盡洗滌液，重復洗滌3次。
（3）將反應板口在吸水紙上，以除盡液體。
2. 封閉：每孔加入200 ul封閉液，37℃孵育60 min，然后洗滌3次。
3. 加入待測血清，37℃溫育1~2 h，洗滌3次。用稀釋液作對照孔，標準曲線的制備是用不容稀釋度的純GST-π。
4. 加酶標抗體：按要求稀釋抗GST-π-IgG-HRP，每孔100 ul，37℃溫育1 h，然后洗滌5次，扣在吸水紙上吸干水分。
5. 顯色：加入TMB應用液，置室溫反應15~30 min，加入50 ul 2 mol/l H2SO4，穩(wěn)定3~5 min，即可比色。
6. 比色：用酶標儀，以PBS-T孔為對照，波長450 nm，測各孔光吸收度（A），查標準曲線，即可測得GST-π含量。
參考文獻：
1.【文獻標題】Tissue engineered artificial liver model based on viscoelastic hyaluronan-collagen hydrogel ａnd the effect of EGCG intervention on ALD
2.【文獻標題】Analysis of the effect of probucol-mecobalamin tablets combination on oxidative stress in patients with diabetic peripheral neuropathy
3.【文獻標題】Effects of sublethal concentrations of cyantraniliprole on the biology ａnd metabolic enzyme activities of Laodelphax striatellus (Fall′en)
原創(chuàng)作者：上海恒遠生物科技有限公司
總訪問量：7897986 
